13:27 2023-03-31
science - citeste alte articole pe aceeasi tema
Comentarii Adauga Comentariu
_ Cercetătorii sugerează o strategie de etichetare a metalelor pentru multiplexarea cu o singură celulă cu citometrie de masă
_ Cercetătorii sugerează o strategie de etichetare a metalelor pentru multiplexarea unicelulare cu citometrie de masă
Cercetătorii de la Institutul Suzhou de Inginerie și Tehnologie Biomedicală (SIBET) al Academiei Chineze de Științe (CAS) au propus recent o nouă strategie de etichetare a metalelor pentru a crește sensibilitatea masei citometrie (MC) și extinde numărul de canale de detecție MC.
MC este o tehnică bioanalitică emergentă pentru interogarea simultană a biomarkerilor de dimensiuni înalte pe celule individuale. Prin utilizarea anticorpilor marcați cu izotopi de metale grele (Abs) pentru colorarea celulelor, MC evită suprapunerea spectrală și fenomenele de auto-fluorescență care limitează sever capabilitățile foarte multiplexate ale citometriei în flux fluorescență convenționale (FCM) și teoretic permite măsurarea și cuantificarea a până la 135 de markeri cu rezoluție cu o singură celulă.
Cu toate acestea, mai mult de 60% dintre canalele izotopice nu au fost implementate din cauza lipsei suporturilor metalice adecvate de captare a izotopilor. Astfel, o abordare nouă pentru sintetiza etichetelor de masă MC este încă plină de provocări.
Strategia, propusă în acest studiu de cercetătorii conduși de prof. Bai Pengli, se bazează pe utilizarea unui material clasic, polistirenul nanoparticule (PS-NP), pentru a transporta metale (pământuri rare, Zr, Hf) și a se conjuga cu anticorpi. Cercetarea a fost publicată în Journal of Colloid and Interface Science.
În prezent, mai multe etichete de masă MC bazate pe nanoparticule au fost raportate că măresc sensibilitatea și extind canalele de detectare a MC. Cu toate acestea, majoritatea dintre ele au nevoie de modificări complicate ale suprafeței în timpul pregătirii sondei pentru a scădea legarea nespecifică a etichetelor de masă la celule.
Prin utilizarea nanoparticulelor de polistiren ca purtători de metal, Liu Zhizhou și colegii săi din grupul BAI au propus o abordare universală pentru sintetizarea etichetelor de masă MC.
Patru noi canale de detectare MC (177Hf, 178Hf, 179Hf și 180Hf) au fost introduse în MC pentru prima dată. Când sunt utilizate împreună cu etichetele de masă de polimer de chelare a metalelor (MCP) disponibile comercial, etichetele de masă metal@PS-NP_Abs pot distinge clar diferite subpopulații de celule mononucleare umane. Noua etichetă de masă a arătat o sensibilitate de cinci ori mai mare decât etichetele de masă MCP.
În plus, a fost raportată o nouă metodă de reducere a legăturii nespecifice prin explorarea unui nou tampon de colorare a celulelor în loc de modificarea complicată a suprafeței și controlul strict al dimensiunii utilizat în alte strategie de proiectare a etichetelor de masă.
În plus, aceste etichete de masă bazate pe PS-NP au arătat o compatibilitate ridicată cu MCP-Abs comerciale pentru detectarea înalt multiplexată a biomarkerilor MNC umani.
„Noi credem că mai mult tipuri de PS-NP cu metale diferite ar fi pregătite pentru etichetele metalice MC, iar sonde cu funcționalitate dublă atât pentru FCM, cât și pentru MC pot fi realizate dacă coloranții adecvați s-ar umfla la PS-NP împreună cu ionii metalici, care pot fi utilizați în ambele MC și citometrie în flux sau imagistică”, a spus Liu, primul autor al studiului.
Comentarii:
Adauga Comentariu