14:36
Comentarii Adauga Comentariu

_ Construirea organoidelor alveolare „pe gel” ca o nouă platformă de screening

_ Construirea 'pe- organoizi alveolari gel' ca o nouă platformă de screening

Un studiu condus de profesorul Shimpei Gotoh (Departamentul de Aplicații Clinice), introduce o nouă metodă de cultură pentru a genera organoizi alveolari potriviti pentru screening-ul cu randament mediu și mare și a identificat mai multe substanțe chimice cu efecte sinergice asupra diferențierii celulelor AT1. Lucrarea este publicată în revista Stem Cell Reports.

Alveolele, unitățile funcționale ale plămânului în care are loc schimbul de gaze, sunt compuse în principal din celule epiteliale alveolare de tip 1 și 2 (celule AT1 și, respectiv, AT2) . Pe lângă producția de surfactanți pulmonari, celulele AT2 sunt celule stem din țesut cuboidal care mențin homeostazia alveolară și reglează procesele regenerative în urma leziunii prin auto-reînnoire și diferențiere în celule AT1.

În schimb, celulele AT1 sunt subțiri și plate. celulele care formează cea mai mare parte a suprafeței alveolare pentru a media schimbul de oxigen și dioxid de carbon. Cunoștințele actuale despre mecanismele de semnalizare care stau la baza diferențierii AT1 de celulele AT2 se bazează în principal pe studiile la șoareci și rămâne neclar dacă există diferențe între specii în procesul de reglementare.

În plus, deși studiile au folosit în mod tradițional AT2 primar uman. celulelor, oferta lor limitată a împiedicat progresul în acest domeniu de cercetare. În mod alternativ, celulele iPS umane reprezintă un material de pornire valoros pentru studierea diferențierii celulelor epiteliale alveolare.

Laboratorul Gotoh a stabilit anterior protocoale de inducție pentru a genera celule AT2 din celulele iPS și pentru a crea organoizi alveolari din celulele iPS derivate de la pacient pentru modelarea bolii. Cu toate acestea, astfel de organoizi nu sunt optimi pentru procedurile de screening, deoarece necesită un număr mare de celule și sunt complet încorporați în Matrigel, un substrat de cultură celulară care seamănă cu mediul extracelular.

În prezentul studiu, cercetătorii au generat un nou dual. reporterul iPS monitorizează diferențierea celulelor AT1 și a derivat o nouă metodă „pe gel” pentru a cultiva organoizi alveolari prin însămânțarea progenitoarelor pulmonare derivate din celule iPS sau a celulelor AT2 deasupra Matrigel în plăci cu 96 de godeuri.

În timp ce alți markeri AT2 au arătat o expresie similară folosind această metodă, celulele AT2 din sferoizii rezultați au exprimat în special niveluri mai mari de proteină C surfactantă decât organoizii alveolari generați folosind protocoale stabilite anterior. În schimb, mai mulți markeri de celule AT1 au fost detectați la niveluri mai scăzute în sferoizii „pe gel”, ceea ce sugerează absența sau imaturitatea acestora.

Deși au fost detectate celule pozitive pentru markeri de celule AT1, analizele transcriptomice au confirmat o mai mare AT2- compoziția dominantă pentru acești sferoizi „pe gel”. În plus, celulele sferoide AT2 au prezentat caracteristici structurale care amintesc de celulele AT2 funcționale.

În totalitate, aceste observații au sugerat că noua metodă de cultură „pe gel”, care necesită un număr mic de celule pentru a genera și o manipulare mai ușoară, este optim pentru procedurile de screening pentru a identifica potențialii inductori ai diferențierii AT1.

Ca o dovadă a principiului, echipa de cercetare a efectuat un screening chimic de capacitate medie cu 274 de compuși folosind celule progenitoare pulmonare crescute cu ajutorul noului lor dezvoltat " „on-gel” și a constatat că 15 substanțe chimice au crescut semnificativ nivelurile reporterului specific celulei AT1.

Au validat în continuare acești compuși candidați examinând capacitatea lor de a îmbunătăți expresia genelor specifice celulei AT1. , AGER, CLIC5 și CAV1.

Printre acestea, LATS-IN-1 și ROCK-IN-2, cunoscuți ca inhibitori ai LATS1/2 și, respectiv, ROCK2, au crescut semnificativ aceste gene marker AT1. În plus față de constatarea că inhibarea LATS1/2 a promovat diferențierea AT1 prin activarea semnalizării YAP/TAZ, cercetătorii au descoperit, de asemenea, că ROCK-IN-2 induce expresia genelor legate de YAP/TAZ. Cu toate acestea, ambii compuși candidați au aglomerat sferoizii și au promovat proliferarea, proprietăți opuse celulelor AT1 (adică, celulele plate și subțiri repaus).

Au testat și alți inhibitori ROCK2, care nu au promovat diferențierea AT1, sugerând că capacitatea ROCK-IN-2 de a induce diferențierea AT1 este probabil atribuită unui efect în afara țintă asupra căii YAP/TAZ.

Alți patru compuși candidați au demonstrat efecte intermediare asupra expresiei genei markerului AT1 și au fost astfel testați pentru efecte sinergice în combinație cu LATS-IN-1 pentru a activa semnalizarea YAP/TAZ. În special, BAY1125976, un inhibitor alosteric AKT, a îmbunătățit sinergic expresia genei AT1 atunci când este combinat cu LATS-IN-1.

În timpul validării, cercetătorii au observat, de asemenea, efecte sinergice între LATS-IN-1 și alte două PI3K/ Inhibitori AKT, Alpelisib și AZD6482.

Descoperiri similare au fost observate atunci când o linie celulară iPS umană independentă sau celule AT2 primare au fost tratate cu aceeași combinație chimică. Prin analize transcriptomice, morfologice și funcționale suplimentare, cercetătorii au descoperit în mod constant că co-tratamentul LATS-IN-1 și BAY1125976 promovează schimbările celulare către un fenotip asemănător celulei AT1.

Prin generarea unui nou dual. reporter linie celulară iPS pentru a monitoriza diferențierea AT1 și pentru a stabili noua metodă de cultură sferoidă „pe gel” compatibilă cu screening-ul de mare randament, această lucrare recentă a identificat modulatorii chimici ai căilor de semnalizare YAP/TAZ și AKT ca un amestec de inductor puternic pentru celula AT1 diferențiere.

Cu posibilitatea de a adapta culturi sferoide „pe gel” pentru ecrane chimice de mare capacitate sau genetice bazate pe CRISPR/Cas, inovațiile dezvoltate în acest studiu vor contribui la propulsarea următoarelor descoperiri în sistemul pulmonar regenerativ. medicament.


(Fluierul)


Linkul direct catre Petitie

CEREM NATIONALIZAREA TUTUROR RESURSELOR NATURALE ALE ROMANIEI ! - Initiativa Legislativa care are nevoie de 500.000 de semnaturi - Semneaza si tu !

Comentarii:


Adauga Comentariu



Citiți și cele mai căutate articole de pe Fluierul:

_ Tot ce poate merge prost cu sânii tăi - și ce să faci în privința asta: ghidul definitiv al DR PHILIPPA KAYE

Romania - Numărul de Profesori la Numărul de Elevi

_ Premier League va introduce tehnologia de detectare a ofsaidului semi-automat

Ingrid Mocanu, după interzicerea bolșevico-soroșista a lui Georgescu : LEGEA a murit Suntem în DICTATURĂ

Prăbușirea demografică a României se datorează în integralitatea partidelor sistemului care au condus România 35 de ani

_ Rusia îi spune mamei lui Alexei Navalny: „Sunteți de acord în termen de trei ore cu o înmormântare privată pentru fiul dumneavoastră sau îl îngropăm în închisoare”

_ RUPTĂ: Tucker Carlson s-a �nt�lnit cu victima violului lui Joe Biden, Tara Reade, și cu denunțătorul NSA, Edward Snowden, �n timp ce se afla la Moscova

_ Oamenii de știință șocați să descopere noi specii de anaconda verde, cel mai mare șarpe din lume

_ Ministerul Finanţelor propune o schemă de ajutor de stat de 2,25 miliarde lei, pentru investiţii de anvergură în regiunile mai puţin dezvoltate

_ FOTO - Asasinat în stil mafiot în Ucraina: un viceprimar a fost împușcat mortal de persoane necunoscute

_ FAA predă îndatoririle Newark de control al traficului aerian către Philadelphia pentru a „aborda problemele de personal”

Fluierul.ro adreseaza o intrebare CSAT si CCR cei care au girat si au dat o adevarata Lovitura de Stat prin ANULAREA ALEGERILOR PREZIDENTIALE si INLATURAREA de la putere a Presedintelui ce urma sa fie ales. Unde e DOVADA implicarii RUSIEI?

Ce este o Lovitură de Stat? A fost împiedecat Călin Georgescu să devină duminică seara pe 6 Decembrie 2024, Președintele României, printr-o lovitură de stat?

_ „Noi nu facem asta aici”: fostul editor al NY Times o aruncă pe „Doamna cenușie” pentru părtinire și activism

_ În relația dulce a reginei Camilla cu câinele ei de salvare „foarte special” Beth, după ce „tovarășul ei mult iubit” a murit

_ Președintele PE vorbește despre adoptarea monedei euro în România, în conferință cu Iohannis/ Video

_ Cercetătorii constată că faptul că are vecini buni și puțini prădători de top face populațiile de pești răpitori mai rezistente

_ Ultimă oră – Valeri Zalujni a fost înlăturat de la șefia armatei ucrainene: Volodimir Zelenski a făcut anunțul

_ Balerina Farm „soția tradițională” Hannah Neeleman detaliază haosul călătoriei cu opt copii

_ Tatăl radical al lui Fani Willis susține că știa dinainte că COVID-19 a venit în timp ce locuia în Africa de Sud în 2019 (VIDEO)

_ Star porno ucraineană pozează cu veterani de război mutilați pentru o ședință foto de caritate

_ Studiul aruncă o nouă lumină asupra răspândirilor de virusuri între specii care pot provoca pandemii

_ Un donator major cere președintelui Universității Cornell să demisioneze pentru că ar fi promovat DEI

_ România în concediu medical | Anomaliile unui sistem: diferențe uriașe între județe, medici cu mii de concedii eliberate

Abia acum apare la orizont “bomba demografică”: Bolojan semnează legea prin care orice refugiat asiatic sau african primește cetățenie română în 3 ani!

_ Clinica de Stomatologie SANADOR asigură pacienţilor accesul la servicii personalizate pentru prevenţia, diagnosticul şi tratamentul afecţiunilor dentare şi gingivale

_ „Viitorul luminos”: CEO-ul Woodside vede că cererea globală de GNL crește cu 50% în următorul deceniu

_ 34 de militari, sechestrați în timpul unei operațiuni împotriva infracțiunilor de mediu în sudul Columbiei, au fost eliberați cu succes

_ Fed F**kery transformă fluxul mare de depozite bancare de 98 miliarde USD (NSA) în flux de 2 miliarde USD

_ Teribila licitație de 20 de ani are a doua cea mai mare coadă, cea mai mică direcție înregistrată; Spikes Randamente

_ Lipă - Europeanul nu e concludent pentru Jocurile Olimpice, dar sportivii vor scăpa de stres şi emoţii

_ Scandal în Sri Lanka din cauza unei petreceri la care erau invitaţi albi îmbrăcaţi în haine albe

_ Adolescent acuzat ca adult după ce a atacat doi profesori �n școală

_ Președintele parlamentului din Africa de Sud demisionează din cauza anchetei de corupție

_ Ucrainenii pot depune cereri de despăgubire la Haga în urma invaziei Rusiei

_ Surse ucrainene, pentru Defense One: Rusia luptă în Ucraina folosind Starlink-ul lui Elon Musk

_ Conducerea Rapidului îl pune la punct pe Gheorghe Mustață, liderul fanilor FCSB: 'Atât pot ei'

_ Alec Baldwin omite premiera emoționantă a Rust, în care regizorul rănit plânge pe defuncta director de fotografiat Halyna Hutchins

_ Serviciul de spionaj extern al Rusiei susține că grupări militare private americane pregătesc o operațiune în Ucraina

_ 'Nașul inteligenței artificiale' face o previziune oribilă: aceasta ar putea în cele din urmă să depășească inteligența umană și să preia controlul

_ Profesorul de drept Jonathan Turley reacționează la procesul lui Trump: „Bizar – Nu sunt de acord cu acest verdict – va fi probabil anulat în apel” (VIDEO)

_ Prima privire la Dwayne „The Rock” Johnson în rolul lui Maui în filmul live-action de la Disney, Moana.

_ Populația evreiască a Iranului contrazice afirmațiile privind intenția de genocid a Teheranului

_ Dr. Phil ajunge la frontiera de sud, îl trântește pe Biden după ce a realizat amploarea adevărată a crizei

_ Serie A: Inter Milano se impune la limită în fața echipei AC Fiorentina. Golul a avut nevoie de validarea VAR

_ COVER-UP: New Documents PROVE Biden DIRECTLY LINKED to Mar-a-Lago RAID | Elijah Schaffer’s Top 5 (VIDEO)

_ Decizie istorică și o premieră juridică în Italia: O firmă de asigurare, daune de 100.000 de euro pentru două românce

_ Uraganul Debby: Guvernatorii din Florida, Georgia şi Carolina de Sud au declarat stare de urgenţă

_ Spionaj la Bruxelles! Ce s-a găsit pe telefoanele oficialilor din subcomisia de apărare a Parlamentului European (POLITICO)

_ O organizaţie de presă afgană îşi suspendă temporar activitatea din cauza situaţiei politice nefavorabile

_ Paradox în unul dintre cele mai dens populate orașe din lume: zone imense sunt înghițite din nou de natură (FOTO)

_ Fenomen neașteptat în natură: specia de furnici care a forțaț leii să își schimbe metoda de hrănire

_ Alegeri în Rusia. Reacţii internaţionale la noul mandat al lui Vladimir Putin: Aliaţii transmit felicitări, Occidentul condamnă victoria

_ Patru sulițe luate de exploratorul James Cook de la aborigeni vor fi returnate Australiei

_ Activitățile antropocenului modifică în mod dramatic fluxul de fluide subterane, descoperă cercetătorii

_ Un burger pentru a-l face pe Satan să transpire - iată de ce Tom Parker Bowles îi acordă patru stele

Prăbușirea criptomonedelor TerraUS și LUNA s-a datorat unui grup restrâns de speculanți care au pariat "short"

Tăcerea democrației: strigătul unei națiuni pentru libertate<

Nimeni nu e mai presus de Lege. Nici măcar Curtean Constituțională


Pag.1 Pag.2 Pag.3 Pag.4 Pag.5 Pag.6 Pag.7
Pag.8 Pag.9 Pag.10 Pag.11 Pag.12 Pag.13 Pag.14

Nr. de articole la aceasta sectiune: 811, afisate in 14 pagini.